【专利摘要】本发明公开了一种SDS-PAGE电泳凝胶脱色液的配方及快速脱色的方法，配方为：250ml乙醇，75ml冰乙酸，纯水定容到1000ml。方法为：取适量上述脱色液，将胶浸没后，在微波炉内低火模式下加热1min，再静置15min后，更换脱色液，重复以上步骤两次就能够实现脱色，整个脱色时间1h内就能够实现。新的脱色液配方降低了乙醇和冰醋酸在整个脱色液中的比例，降低了成本。配合快速脱色方法，可以在1h内就完成整个脱色过程，方便快捷。操作简单便捷，不要特殊设备。

  [0001] 本发明属于电泳凝胶脱色技术，具体涉及了 SDS-PAGE电泳凝胶脱色液的配方与快速脱色方法。

  [0002]聚丙烯酸胺凝胶电泳(sodiumdodecyl sulfate polyacrylamide gelelectrophoresis, SDS-PAGE)已成为现代生物学研究中重要的技术方法,是对蛋白质进行纯度及含量鉴定的一种经济、快速、可重复的方法。SDS-PAGE电泳基础原理是在聚丙烯酰胺凝胶系统中，加入一定量的十二烷基硫酸钠(SDS)，SDS是一种阴离子表面活性剂，加入到电泳系统中能使蛋白质的氢键和疏水键打开，并结合到蛋白质分子上，使各种蛋白质-SDS复合物都带上相同密度的负电荷，其数量远超于了蛋白质分子原有的电荷量，从而掩盖了不一样的种类蛋白质间原有的电荷差别。此时，蛋白质分子的电泳迁移率主要根据它的分子量大小，而其它因素对电泳迁移率的影响几乎能忽略不计。SDS-PAGE电泳易于操作，用途广泛，它已成为许多研究领域中一种重要的分析技术。SDS-PAGE包括四个主要步骤，即:凝胶制备、电泳、染色、脱色。其中凝胶制备和电泳已有成熟的技术和专用设备，目前SDS-PAGE的凝胶染色主要方法有考马斯亮蓝染色和银染等，其中考马斯亮蓝染色应用最为广泛。然而考马斯亮蓝染色后需进行脱色，将聚丙烯酰胺凝胶上非特异性结合的考马斯亮蓝脱掉后，才能显示出清晰的电泳条带。正常的情况下凝胶脱色需要用醋酸-甲醇或醋酸-乙醇脱色液在脱色摇床上至少脱色3 h，不能及时看到实验结果。

  [0003]本发明目的是为了提供一种SDS-PAGE电泳凝胶脱色液的配方与快速脱色方法。

  一种SDS- PAGE电泳凝胶脱色液的配方，每1000 ml所述的脱色液中含有下述原料:乙醇240~260 ml、冰乙酸70~80 ml，剩余的为去离子水。

  (2)第一次脱色:用上述配方的脱色液将胶浸没后，在微波炉内低火模式下加热1~1.2min，静置13~16min后，将脱色液倒出，完成第一次脱色；

  (3)第二次脱色:再次用上述配方的脱色液将胶浸没后，在微波炉内低火模式下加热1~1.2min，静置13~16min后，将脱色液倒出，完成第二次脱色；

  (4)第三次脱色:最后用上述配方的脱色液将胶浸没后，在微波炉内低火模式下加热1~1.2min，再静置13~16min后，将脱色液倒出，完成脱色；

  [0006]所述电泳凝胶染色方法是考马斯亮蓝染色。[0007]本发明的优点是:

  (I)可以在Ih内就完成整个脱色过程，而传统的脱色过程需要3h才能完成脱色。

  [0008](2)新的脱色液配方降低了乙醇和冰醋酸在整个脱色液中的比例，乙醇降低了15%~20%的使用量，冰醋酸能节约5%~?Ο%的使用量，节省了成本。

  图2:基因工程原核表达猪干扰素α蛋白使用本发明方法脱色所得SDS-PAGE电泳图。

  一种SDS- PAGE电泳凝胶脱色液的配方，每1000 ml所述的脱色液中含有下述原料:乙醇240~260 ml、冰乙酸70~80 ml，剩余的为去离子水。

  (2)第一次脱色:用上述配方的脱色液将胶浸没后，在微波炉内低火模式下加热lmin，静置15min后，将脱色液倒出，完成第一次脱色；

  (3)第二次脱色:再次用上述配方的脱色液将胶浸没后，在微波炉内低火模式下加热lmin，静置15min后，将脱色液倒出，完成第二次脱色；

  (4)第三次脱色:最后用上述配方的脱色液将胶浸没后，在微波炉内低火模式下加热lmin，再静置15min后，将脱色液倒出，完成脱色；

  1.一种SDS- PAGE电泳凝胶脱色液的配方，其特征是:每1000 ml所述的脱色液中含有下述原料:乙醇24(T260 ml、冰乙酸7(T80 ml，剩余的为去离子水。

  2.一种如权利要求1所述的SDS- PAGE快速脱色的方法，其特征是:它包括以下步骤: (1)凝胶清洗:电泳凝胶染色结束后，用纯水将胶清理洗涤干净； (2)第一次脱色:用上述配方的脱色液将胶浸没后，在微波炉内低火模式下加热1~1.2min，静置13~16min后，将脱色液倒出，完成第一次脱色； (3)第二次脱色:再次用上述配方的脱色液将胶浸没后，在微波炉内低火模式下加热1~1.2min，静置13~16min后，将脱色液倒出，完成第二次脱色； (4)第三次脱色:最后用上述配方的脱色液将胶浸没后，在微波炉内低火模式下加热1~1.2min，再静置13~16min后，将脱色液倒出，完成脱色； (5)结果保存:将胶进行扫描以及制备干胶。

  3.根据权利要求2所述的SDS-PAGE快速脱色方法，其特征是:所述电泳凝胶染色方法是考马斯亮蓝 染色。

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